超聲波細(xì)胞破碎儀在提取實(shí)驗(yàn)時(shí)要考慮到超聲功率的大小是否能確保在破碎蛋白的同時(shí)不會(huì)使蛋白造成損壞,了解不多的可以直接咨詢(xún)儀器廠(chǎng)家。
方法一:
1、把你要破碎的蛋白防到燒杯中,將細(xì)胞破碎儀的探頭放到材料中,開(kāi)電源設(shè)定工夫 一個(gè)是震動(dòng)的時(shí)間一個(gè)是間歇的時(shí)間;
2、留意在破碎的進(jìn)程中會(huì)少量的產(chǎn)熱,普通的都是冰浴下破碎;
3、預(yù)備好功能波動(dòng)的超聲波細(xì)胞破碎儀,然后將需求破碎的植物組織,植物組織,細(xì)菌或許病毒細(xì)胞水溶液丟到燒杯或者中;
4、固定好支架,將超聲波細(xì)胞破碎儀固定在支架上,然后翻開(kāi)超聲波發(fā)作器,設(shè)定好任務(wù)時(shí)間,脈沖工作或者延續(xù)式工作;
5、設(shè)定好工作功率或者工作振幅,超聲波細(xì)胞破碎儀就會(huì)開(kāi)機(jī)停止細(xì)胞破碎,依據(jù)詳細(xì)要求,處置一段時(shí)間后即可破碎完成;
6、破碎完成后細(xì)胞內(nèi)容物就會(huì)破壁而出,流入到酒精或者水里。然后就可以進(jìn)行應(yīng)用或者其他研討。
方法二:
1、混懸在至少兩倍體積的緩沖液內(nèi);洗去培養(yǎng)液的細(xì)胞,混懸在至少兩倍體積的緩沖液中;
2、將超聲探頭沒(méi)入混懸液內(nèi),進(jìn)行超聲破碎。分為幾個(gè)周期,周期之間讓樣品在冰浴中冷卻即可,不用加裂解液。
然后用超聲波細(xì)胞破碎儀破碎細(xì)菌,首先將吸取5ml的細(xì)菌放入試管中,然后放在超聲儀中,開(kāi)80hz的頻率進(jìn)行破碎細(xì)菌,待到細(xì)菌全部破碎,溶液變清亮為止,然后你可以洗滌沉淀,進(jìn)行包涵體蛋白的收集。
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