超聲波細(xì)胞破碎儀是基于超聲波在液體中的空化作用,換能器將電能量通過變幅桿在工具頭部液體中產(chǎn)生高強(qiáng)度剪切力,形成高頻的交變水壓強(qiáng),使空腔膨脹、爆炸將細(xì)胞擊碎。另一方面由于超聲波在液體中傳播時(shí)產(chǎn)生劇烈地?cái)_動(dòng)作用,使顆粒產(chǎn)生很大的加速度,從而互相碰撞或與器壁互相碰撞而擊碎。
超聲波是物質(zhì)介質(zhì)中的一種彈性機(jī)械波,它是一種波動(dòng)形式,因此它可以用于探測人體的生理及病理信息,即診斷超聲。同時(shí),它又是一種能量形式,當(dāng)達(dá)到一定劑量的超聲在生物體內(nèi)傳播時(shí),通過他們之間的相互作用,能引起生物體的功能和結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,即超聲生物效應(yīng)。
超聲對(duì)細(xì)胞的作用主要有熱效應(yīng),空化效應(yīng)和機(jī)械效應(yīng)。熱效應(yīng)是當(dāng)超聲在介質(zhì)中傳播時(shí),摩擦力阻礙了由超聲引起的分子震動(dòng),使部分能量轉(zhuǎn)化為局部高熱,從而殺傷癌細(xì)胞而正常組織不受影響。
運(yùn)行時(shí)需要注意:
1、切記空載(一定要將超聲變幅桿插入樣品后才能開機(jī),)
?。?、變幅桿探頭要居中,不要貼壁。超聲波是垂直縱波,插入太深不容易形成對(duì)流,影響破碎效率。
?。场⒊晠?shù)設(shè)置:設(shè)置鍵好儀器工作參數(shù)(具體設(shè)置見說明書),對(duì)于對(duì)溫度要求比較敏感的樣品一般外面采用冰浴,實(shí)際溫度肯定是低于25度,蛋白核酸是不會(huì)變的?! ?/p>
1)時(shí)間:超聲時(shí)間每次不要超過5秒,間隙時(shí)間應(yīng)大于或等于超聲時(shí)間,以便于熱量散發(fā)。時(shí)間設(shè)定應(yīng)以超聲時(shí)間短,超聲次數(shù)多原則,可延長超聲機(jī)子以及探頭的壽命?! ?/p>
2)超聲功率:不宜太大,以免樣品飛濺或起泡沫,如小于10ml樣品容量,功率應(yīng)在200w以內(nèi),選用2mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿選擇開關(guān)打到相應(yīng)擋;10-200ml樣品容量的功率在200-400w,選用6mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿打到相應(yīng)擋;200ml以上的樣品容量功率在300-600w之間,選用10mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿打到相應(yīng)擋;(2MM的小探頭功率嚴(yán)禁超過350W)
3)容器選擇:有多少的樣品就選多大的燒杯,這樣也是有利樣品在超聲中對(duì)流,提高破碎效率。例如;20ML的處理量用20ML的燒杯。如100ml大腸桿菌樣品設(shè)置參數(shù):超聲5秒/間隙5秒次數(shù)70次(總時(shí)間為10分鐘)。功率300W(僅供參考)
4、若樣品放在1.5ml的EP管里請(qǐng)一定要將EP管固定好,以防冰浴融化后液面下降導(dǎo)致空載
5、日常保養(yǎng):超聲波細(xì)胞破碎儀用完后用酒精擦洗探頭或用清水進(jìn)行超聲!
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